UPLC-MS/MS法测定人血浆中25羟基维生素D的浓度及其应用 点击下载
| 论文标题： | UPLC-MS/MS法测定人血浆中25羟基维生素D的浓度及其应用 |
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| 中文摘要： | 目的：建立测定人血浆中25羟基维生素D[25（OH）D]的方法，并将其应用于临床。方法：血浆样品经液-液萃取后，采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。以氘代25（OH）D3为内标，色谱柱为Zorbax Eclipse Plus C18，流动相为水（含0.1％甲酸）-甲醇（含0.1％甲酸），梯度洗脱，流速为0.35 ml/min，柱温30 ℃采用电喷雾离子源，以多反应离子监测方式进行正离子扫描；用于定量分析的离子对分别为m/z 413.2→395.2[25（OH）D2]、m/z 401.2→383.2[25（OH）D3]、m/z 404.3→368.2（内标）。结果：25（OH）D2与25（OH）D3血药浓度在2～80 ng/ml范围内线性关系均良好（r分别为0.998 0、0.999 9，n＝3），其定量下限均为2 ng/ml，日间、日内RSD为0.78％～9.42％，相对偏差为－2.90％～1.95％。采用该法检测78例健康受试者及98例结核患者体内25（OH）D平均血药浓度分别为（21.53±6.33）、（8.84±4.05）ng/ml，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：该方法准确、可靠、灵敏度高，适用于血浆中25（OH）D的定量分析及人体药动学研究。 |
| 英文摘要： | OBJECTIVE： To establish the method for the determination of 25-hydroxyvitamin D [25（OH）D] in human plasma， and apply it in the clinic. METHODS： After liquid-liquid extraction， UPLC-MS/MS method was used to determine plasma sample. Using deuteron-25（OH）D3 as internal standard， the determination was performed on Zorbax Eclipse Plus C18 column with mobile phase consisted of water （containing 0.1％ formic acid）-methanol （containing 0.1％ formic acid） in gradient mode at flow rate of 0.35 ml/min， and the column temperature was 30 ℃. By ESI， positive ion scanning was conducted in MRM mode； the monitoring transition ion-pair was m/z 413.2→395.2 for 25（OH）D2， m/z 401.2→383.2 for 25（OH）D3 and m/z 404.3→368.2 for internal standard. RESULTS： The linear range of 25（OH）D2 and 25（OH）D3 were both 2-80 ng/ml （r＝0.998 0 and 0.999 9， n＝3）； the limit of quantitation was 2 ng/ml. RSDs of inter-day and intra-day were 0.78％-9.42％， and relative deviation were －2.90％-1.95％， respectively. Average plasma concentration of 25（OH）D in 78 health volunteers and 98 tuberculosis patients were（21.53±6.33）and（8.84±4.05）ng/ml， with statistical significance （P＜0.01）. CONCLUSIONS： The method is accurate， reliable and sensitive. It is suitable for quantitative analysis and pharmacokinetic study of 25（OH）D in human plasma. |
| 期刊： | 2016年第27卷第14期 |
| 作者： | 张叶，郭少晨，朱慧，郭超，陆宇，陈效友 |
| 英文作者： | ZHANG Ye，GUO Shaochen，ZHU Hui，GUO Chao，LU Yu，CHEN Xiaoyou |
| 关键字： | 超高效液相色谱-串联质谱法；25羟基维生素D2；25羟基维生素D3；25羟基维生素D；血药浓度 |
| KEYWORDS： | UPLC-MS/MS； 25-hydroxyvitamin D2； 25-hydroxyvitamin D3； 25-hydroxyvitamin D； Plasma concentration |
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